Skip to content
1.1.3.3.5 A férfi meddőség kivizsgálása
1.1.3.3.5.4 Spermiumanalízis
A hagyományos spermiumparaméterek (volumen, pH, spermiumszám, motilitás, morfológia) nem korrelálnak teljes mértékben a férfi fertilitásával és a meddőségi kezelések kimenetelével. Ezért fontos olyan tesztek elvégzése is, melyek a spermiumokat funkció és genetikai integritás szempontjából képesek vizsgálni. A spermiumok az érés során jellegzetes változásokon mennek keresztül, melyek lehetővé teszik a női genitális traktusban a petesejthez való eljutást és a sikeres megtermékenyítést. A spermiumtermelődés során az elősejtek (spermatogoniumok) mitotikus és meiotikus osztódások eredményeként jutnak el az érett haploid ivarsejt állapotba. A folyamat során a spermium membrán átalakuláson megy végig, a citoplazma lényegesen redukálódik, kapacitáció (a sejtmembránban csökken a koleszterol/foszfolipid arány, megjelennek rajta a zona-kötő fehérjék), majd akroszóma-reakció (a spermiumokat a petesejtmembránon történő átjutásra alkalmassá tevő enzimek aktiválódnak) zajlik le, melyek eredményeként a spermium megtermékenyítő képessé válik. A spermiumérés folyamatának bármilyen zavara férfi eredetű meddőséget eredményezhet.
Hialuronsav kötési próba - HBA teszt (spermiumok funkcionális vizsgálata)
A HBA-teszt egy, a friss ejakulátumban lévő érett spermiumok arányának megállapítására szolgáló módszer, mely az érett spermiumok hialuronsavkötő képességén alapszik. A petesejtet körbevevő hialuronsav-molekulák a hímivarsejtek természetes szelekciójában vesznek részt. Csak érett, a felszínén hialuronsav-receptorral rendelkező spermium képes elérni a petesejtet. A hialuronsav-kötő spermiumok normál morfológiájúak, magas szintű DNS integritással rendelkeznek és alacsony az aneuploidiák (kromoszómaszámbeli eltérések) aránya. A teszt során a spermiumok a fejrészükkel a hialuronsav-cseppekhez kötődnek. Az eredmény akkor normális, ha a hímivarsejtek legalább 60-80%-a kötődik. Alacsonyabb kötődés éretlen, hibás fejlődésű vagy sérült DNS-t nagyobb valószínűséggel tartalmazó spermiumokat jelez.
Dr. Kanyó Katalin. Új laboratóriumi paraméterek a meddőség megítélésében. Szent János Kórház, Budai Meddőségi Centrum. Diagnosticum 2014.
A molekuláris biológiai vizsgálómódszerek fejlődésével lehetővé vált a hímivarsejt örökítő anyagának rutinszerű laboratóriumi vizsgálata, a spermium DNS-fragmentáció mérése. A meghatározásra többféle eljárás is létezik, melyek közül az egyik legelterjedtebb az SCSA technika.
Sperm chromatin structure assay - SCSA (spermium DNS-fragmentációs teszt vagy spermiumkromatin szerkezeti teszt)
A DNS fragmentáltságának kialakulásához mind külső, mind pedig belső tényezők hozzájárulhatnak. Ezek mindegyikében közös, hogy kapcsolatba hozhatóak reaktív oxigén-szabadgyökök (ROS) képződésével, amelyek oxidatív károsodásokhoz vezethetnek. A ROS-ok kórosan megemelkedett koncentrációja számos káros hatás kifejtésére képes, rendkívül reaktívak, képesek az élő sejteknek gyakorlatilag bármilyen összetevőjével reakcióba lépni, károsítani azt, úgy, mint a szénhidrátokat, fehérjéket, lipideket, de magát az örökítő anyagot is, amely utóbbinak fragmentálódása hibás génátírást vagy hibás kromoszóma-szegregációt, aneuploidiát okozhat.
A SCSA-módszerrel a hímivarsejtekben lévő DNS állomány sérülését, töredezettségét (fragmentáltságát) vizsgálják. A hímivarsejtekben a DNS információ speciális formában “csomagolva” található. Az információt hordozó DNS szálak külső és belső tényezők hatására sérülhetnek, töredezhetnek ezáltal az átadható DNS károsodik, melynek következtében a várt terhesség elmarad, korai vetélés alakul ki, a lombik eljárások válhatnak sikertelenné. A DNS állomány sérülését okozhatják a különböző férfi reproduktív rendszert érintő gyulladások/fertőzések, dohányzás, emelkedett életkor, táplálkozás, here visszértágulat, daganatos betegségek, cukorbetegség, magas here hőmérséklet, alacsony antioxidáns szint és egyéb környezeti tényezők.
Ha a DNS állomány sérülése fokozott, akkor még normális spermium paraméterek (szám, mozgás, morfológia) esetén sem jön létre a terhesség.
A vizsgálat során első lépésben a DNS denaturálása, majd ezt követően akridin narancs festése történik. A teszt során 5000–10 000 sejtet vizsgálnak. A fragmentált (töredezett) DNS vörösre, a kétszálú, ép DNS zöldre festődik. A vörös színű festődés aránya adja meg a DNS fragmentációs indexet (DFI). 15% alatti DNS fragmentáció jó eredmény jelent, kiváló a fertilizációs potenciál. 27–30% feletti DFI rossz fertilizációs potenciált mutat, esetében csökkent a terhesség létrejöttének esélye.
A spermiumok DNS-fragmentációs vizsgálatának indikációi. Máté Gábor dr. és mtsai: A spermiumok DNS-fragmentációs vizsgálatának vizsgálati módszerei és szakirodalmi indikációi. MAGYAR UROLÓGIA, XXXIII. ÉVFOLYAM, 3. SZÁM (2021):125–128.
Forrás:
Máté Gábor dr. és mtsai: A spermiumok DNS-fragmentációs vizsgálatának vizsgálati módszerei és szakirodalmi indikációi. MAGYAR UROLÓGIA, XXXIII. ÉVFOLYAM, 3. SZÁM (2021):125–128.
Pásztor Norbert: Férfi eredetű meddőség. In: A meddőség korszerű diagnosztikája és kezelése. Medicina Könyvkiadó, Budapest, Magyarország, pp. 121-168. (2018)
Want to print your doc?
This is not the way.
This is not the way.
Try clicking the ⋯ next to your doc name or using a keyboard shortcut (
CtrlP
) instead.